BIOLOGIA MOLECULAR APLICADA AO DIAGNÓSTICO E CARACTERIZAÇAÕ DE CISTOS DE Giardia duodenalis EM AMOSTRAS CLÍNICAS DE PARNAÍBA, PIAUÍ
enteroparasitose, Giardia, protozoário, PCR, genótipos.
Atualmente, apesar dos inúmeros avanços científicos e tecnológicos na área de diagnósticos parasitológicos e no campo da saúde coletiva, as parasitoses intestinais ainda constituem um grave problema de Saúde Pública. Possuem distribuição cosmopolita, sendo altamente prevalentes tanto em países em desenvolvimento como em países desenvolvidos. Essa situação é decorrente, principalmente, da falta de recursos, infraestrutura sanitária e medidas de educação em saúde. A maioria dessas enteroparasitoses causa diarreias, seguidas de dores abdominais e algumas vezes até febre, provocando entre outros sintomas, retardo no crescimento em crianças. Dentre essas infecções parasitárias, a giardíase, causada pelo protozoário Giardia duodenalis, é considerada a mais comum em humanos e animais, com distribuição global de 2,8 x 108 casos por ano. Sendo transmitida principalmente através de água, ingestão de verduras e frutas cruas contaminadas por cistos de Giardia duodenalis. Seu diagnóstico é geralmente realizado através da microscopia convencional, no entanto, dada a sua importância atual métodos moleculares tem sido desenvolvidos para a sua detecção. O objetivo desse trabalho é avaliar morfologicamente e geneticamente cistos de G. duodenalis em amostras clínicas de humanos provenientes do município de Parnaíba, Piauí. Inicialmente serão realizadas as coletas clínicas para busca de espécimes positivos para G. duodenalis, as amostras são processadas segundo o método de Faust. As positivas serão purificadas e armazenadas em nitrogênio líquido para posterior caracterização molecular. Em seguida, será realizada a extração do material genético e realizada a PCR convencional, através da amplificação dos segmentos dos genes bg e ITS. Posteriormente, realizar-se-á o sequenciamento, permitindo a diferenciação de genótipos G. duodenalis. Os cromatogramas das sequências serão avaliados usando Sequence Scanner (version 1.0). Os dados obtidos serão armazenados no programa EpiData (versão 3.1) e analisados pelo programa EPI INFO 3.3.2. Para análise das variáveis numéricas será utilizado ANOVA.