A produção de nanopartículas de prata (AgNPs) utilizando extratos naturais vem se tornando importante alternativa para potencializar atividades biológicas. Extratos de Hibiscus sabdariffa L. possuem inúmeras propriedades terapêuticas descritas, mas ainda há poucos relatos de formulações de AgNPs utilizando essa espécie. No presente trabalho, foram realizadas extrações aquosas e etanólicas de cálices (EAHSC e EEHSC) e folhas (EAHSF e EEHSF) de Hibiscus sabdariffa L., para os quais realizou-se a triagem fitoquímica preliminar e avaliação das atividades antibacteriana, antioxidante e de inibição enzimática. Utilizando os extratos aquosos de cálices e folhas foram sintetizadas AgNP-EAHSC e AgNP-EAHSF respectivamente. Rendimentos maiores foram obtidos nas extrações etanólicas. Todas as amostras apresentaram-se ácidas, sendo que os valores de pH de cálices foram mais baixos que os de folhas. Os perfis de constituintes fitoquímicos foram semelhantes, onde fenóis, taninos, flavonas, flavonóis, xantonas e polissacarídeos foram encontrados em todos os extratos, antocianinas e antocianidinas somente em EAHSC e alcaloides apenas nos etanólicos. Verificou-se maiores teores de compostos fenólicos nos cálices e de flavonoides nas folhas. EEHSF e EAHSC apresentaram maior e menor capacidade antioxidante, respectivamente. Não foi verificada atividade antibacteriana para Staphylococcus aureus e Escherichia coli. Entre os extratos testados para atividade de inibição da enzima acetilcolinesterase, EEHSC exibiu maior porcentagem de inibição com valor de IC 50 de 2,80 mg/mL. A formação de AgNP-EAHSC foi confirmada por espectroscopia UV/visível, e seguiu-se com a caracterização da mesma, onde verificou-se tamanho médio de partículas nanométrico e estabilidade moderada.