Os polímeros obtidos a partir de recursos renováveis despertaram um interesse crescente nos últimos anos em razão, principalmente, de questões ambientais, sendo o Poli(Ácido Láctico) (PLA) considerado um dos polímeros mais promissores para diversas aplicações. No entanto, os filmes desenvolvidos à base apenas de PLA dispõem de muitas limitações, como a baixa barreira a gases, ductilidade, tenacidade e a ausência de atividade contra os microrganismos (bactérias e fungos), e para superara-las à incorporação de argila na matriz tem se mostrado eficiente, bem como, de óleos essenciais. Em especial, a argila organofílica comercial Cloisite 30B (C30B) tem sido bastante utilizada nos trabalhos científicos para melhorar as propriedades de matrizes biodegradáveis, como a de PLA, Poli(ε-Caprolactona) (PCL) e Polihidroxibutirato (PHB) e, particularmente, o desenvolvimento de filmes antimicrobianos com a incorporação de Óleo Essencial de Orégano (OEO) têm atraído grande atenção da indústria alimentícia. Diante do exposto, neste trabalho foram desenvolvidos, via moldagem por compressão, filmes de PLA Puro, PLA/C30B (2, 4 e 6% de C30B) e PLA/C30B/OEO (2, 4 e 6% de C30B e OEO) e, posteriormente, caracterizados por: avaliação visual, espessura, teor de umidade, microscopia óptica (MO), FTIR, TG, barreira à luz visível (transmitância) e ensaio antimicrobiano in vitro. A análise por avaliação visual, de modo geral, indicou que os filmes mostraram um bom acabamento superficial, e através da espessura média dos filmes foi observada uma variação entre 0,15–0,19 mm e que com a incorporação de OEO aos filmes de nanocompósitos ocorreu uma maior redução de espessura em comparação a incorporação de C30B. O teor de umidade sofreu um aumento com a incorporação de C30B e OEO. As micrografias ópticas indicaram uma morfologia com uma boa distribuição de partículas de argila na matriz, no entanto, o efeito da incorporação de OEO aos filmes de nanocompósitos não ficou evidente. Por FTIR foi confirmada a incorporação de OEO aos filmes. As curvas termogravimétricas indicaram que a incorporação de C30B e OEO não influenciou significativamente a estabilidade térmica dos filmes e após o processamento mais de 70% de OEO permaneceu retido nos filmes. A transparência dos filmes de nanocompósitos aumentou com a incorporação de OEO, enquanto os filmes com a argila C30B apresentaram uma maior opacidade. Apesar da pouca inibição dos filmes de PLA/C30B contra a S. aureus, os resultados exibiram que as partículas de argila podem ser incorporadas na matriz de PLA como um antimicrobiano para fornecer propriedades funcionais, e em relação a incorporação de OEO foi observado que não houve uma atividade antimicrobiana eficiente devido à baixa difusão de compostos ativos do OEO para o meio de cultura. É indispensável a realização de mais estudos para analisar a atividade antimicrobiana dos filmes em função do teor de OEO e C30B. A combinação entre a argila C30B e o OEO na matriz de PLA para embalagem é uma proposta promissora, mas outras análises devem ser realizadas para uma melhor compreensão do desempenho dos filmes.