Criopreservação do sêmen caprino: Efeito do tempo de equilíbrio sobre a qualidade do sêmen após a descongelação
Tempo de equilibrio, tris-gema, caprino.
Nas últimas décadas, esforços têm sido realizados no sentido de otimizar as biotécnicas reprodutivas já existentes, objetivando com isso o aumento da sua aplicabilidade, já que a utilização das mesmas são condições indispensáveis para o aumento da eficiência produtiva dos rebanhos. Nesse sentido muitas pesquisas vem demonstrado a importância do período de equilíbrio ao qual o sêmen caprino deve ser submetido após o resfriamento, poucos trabalhos têm sido desenvolvidos com o objetivo de avaliar o período ideal para a prevenção de alterações morfológicas durante o processo de congelação do sêmen caprino. Diante disto, bjetivou-se testar diferentes tempos de equilíbrio durante o processo de criopreservação seminal, onde utilizou-se quatro caprinos, com idade variando de 2 a 3 anos. Os animais foram divididos em três grupos: G1, G2, G3. O sêmen colhido foi, diluído em meio à base de Tris-gema e envasado em palhetas de 0,25mL, com dose de 100 x 106 espermatozóides. As amostras de sêmen foram distribuídas nos diferentes protocolos de tempo de equilíbrio. O grupo1 (1h de tempo de equilibrio), o grupo 2 (2 h de tempo de equilibrio) e o grupo 3 (3 h de tempo de equilíbrio). As amostras foram refrigeradas até atingirem uma temperatura de de 5ºC. Em seguida, foram mantidas a temperatura de 5ºC até completarem 1h de tempo de equilíbrio (G1), 2h de tempo de equilíbrio (G2) e 3 h para o (G3). Após esse processo as amostras eram colocadas em vapor de nitrogênio líquido (-196ºC) e mantidas por 20 min. Ao final foi efetuado o processo de congelação em botijões criogênicos. A descongelação foi realizada em banho-maria a 37oC por 30 segundos. As médias obtidas para motilidade foram 19,375%, 16,875% e 16,250% respectivamente para G1, G2 e G3. A motilidade e o vigor espermático espermático foram avaliados pelo TTR nos diferentes tempo: 0, 60, 120, 180 minutos,onde foi verificada diferença significativa dentro dos parâmetros avaliados (P< 0,05). Para avaliação da integridade da membrana foi usado dois fluocromos, o acetato de carboxifluoresceína e o iodeto de propídeo, segundo a técnica descrita por Harrison e Vecks (1990). No tocante a análise estatística, os resultados obtidos foram avaliados pelo PROC GLM (Softaware Statistical Analysis System for Windows SAS® (SAS, 2001) e procedeu-se o teste de Tukey a 5%. Neste estudo foi demonstrado efeito do período de equilíbrio, sobre a viabilidade do sêmen caprino após o processo de congelação-descongelação, onde o sêmen exposto ao menor tempo de refrigeração apresenta uma maior viabilidade espermática.