Os materiais de origem natural aparecem como alternativas cada vez mais atrativas para o desenvolvimento de novos materiais visando a melhoria da saúde e da qualidade de vida da sociedade. Neste sentido, os argilominerais aliam sua capacidade adsortiva, estabilidade térmica, reforço mecânico, viscosidade e biocompatibilidade à possibilidade de imobilização de moléculas bioativas no desenvolvimento de materiais multifuncionais. A palygorskita (PAL), um argilomineral natural de morfologia fibrosa, de ocorrência no estado do Piauí, apresenta potencial para ser usado na ancoragem de moléculas orgânicas. Entre a diversidade de biomoléculas bioativas, os peptídeos antimicrobianos (PAMs) apresentam propriedades antibacteriana, antiviral, antifúngica e antiparasitária podendo atuar como moléculas terapêuticas ou como elementos no reconhecimento de agentes patogênicos. Diante do potencial destes materiais, propomos no presente trabalho a imobilização do peptídeo Dermaseptina 01 (DRS 01) no argilomineral PAL por meio da técnica Layer-by-Layer (LbL) de automontagem para o desenvolvimento de materiais multifuncionais. A PAL foi submetida a processos de purificação física e química para o enriquecimento de suas propriedades adsortivas e a concentração do argilomineral. A caracterização ocorreu por Difratometria de Raios X, Espectroscopia de Infravermelho com Transformada de Fourier, Espectrometria de Fluorescência de Raio X, Microscopia Electrônica de Varredura e Microscopia Electrônica de Transmissão. Os filmes de LBL foram preparados alternando a imersão de substratos de óxido de estanho dopado com índio (ITO) em dispersões de 1 mg/mL de PAL e DRS 01 durante cinco minutos. Os filmes foram caracterizados eletroquimicamente por Voltammetria Cíclica (VC) em tampão fosfato de potássio a 0,1 mol L-1 (pH 7,25 a 50 mV/s), Espectroscopia no UV-Visível, Espectroscopia de Infravermelho com Reflexão Total Atenuada e Microscopia de Força Atômica. A PAL purificada apresentou enriquecimento de suas propriedades conforme confirmado pelas técnicas DRX e FTIR com redução pronunciada dos picos de quartzo. Os resultados para os filmes ITO/DRS 01 e ITO/PAL/DRS 01 mostraram um processo de oxidação em +0,77 V, confirmando que a DRS 01 manteve seu comportamento eletroativo, quando intercalada com a PAL. Os resultados de VC mostraram diferenças na densidade de corrente de 1,82 μA cm-2 para o filme contendo PAL não purificada (ITO/PAL-IN/DRS 01) a 2,63 μA cm-2 no filme contendo PAL 01 purificada. Já o filme de 3 bicamadas ITO/(PAL/DRS 01)3 mostrou um aumento no valor de densidade de corrente para 4,60 μA cm-2 em comparação com o filme com uma única bicamada. A purificação do argilomineral teve um papel importante na resposta dos filmes formados, os quais surgem como uma alternativa para o desenvolvimento de plataformas versáteis e de fácil preparação. Esta pesquisa contribui agregando valor a PAL, um material regional, ao possibilitar ao mesmo esta nova aplicação. Desta forma, apresenta-se a possibilidade de aplicações biotecnológicas deste sistema no revestimento de biomateriais ou na produção de dispositivos sensores como, por exemplo, para a biodetecção de agentes patogênicos em análises clínicas.