Banca de QUALIFICAÇÃO: MARLON DE ARAÚJO CASTELO BRANCO

Uma banca de QUALIFICAÇÃO de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: MARLON DE ARAÚJO CASTELO BRANCO
DATA: 04/12/2015
HORA: 08:00
LOCAL: NUPCelt/UFPI
TÍTULO:

Antioxidantes e inibidores de serino proteases sobre a viabilidade espermática de bovino Curraleiro Pé-duro no processo de criopreservação.

PALAVRAS-CHAVES:

Antioxidantes, Inibidores de Serino proteases, Espermatozóides, Criopreservação, Bovino, Curraleiro Pé-Duro 

PÁGINAS: 111
GRANDE ÁREA: Ciências Agrárias
ÁREA: Medicina Veterinária
RESUMO:

Este estudo foi realizado com o objetivo de avaliar os efeitos de diferentes concentrações de inibidores de serino protease, inibidor do ativador do plasminogênio 1 – PAI-1 (70 ƞg, 140 ƞg e 210 ƞg), Antipaina (10 µg, 50 µg e 100 µg) e deferentes antioxidantes, óleo essencial de limão (Citrus limon), limoneno R-(+) e limoneno S-(-)  nas concentrações de (0µM, 50µM, 100µM e 150µM) na suplementação ao diluidor de congelamento de sêmen bovino. Trinta e seis ejaculados de quatro bovinos Curraleiro Pé-Duro foram usados para criopreservação espermática. Espermatozóides criopreservados em diferentes concentrações de inibidores de serino proteases foram submetidos à análise pós-descongelamento, da motilidade espermática assistida por computador (CASA) para avaliar as características da cinética espermática. A microscopia de epifluorescência foi utilizada para determinar a integridade acrossomal, integridade da membrana plasmática e potencial de membrana mitocondrial. Microscopia de contraste de fase foi utilizada para avaliar os defeitos espermáticos, no qual foram classificados em: defeitos maiores, menores e totais. Espermatozóides criopreservados em diferentes concentrações de antioxidantes foram submetidos a análise pós-descongelamento, da motilidade espermática assistida por computador (CASA) para avaliar as características da cinética espermática. A citometria de fluxo foi utilizada para detecção de espécies reativas ao oxigênio (ROS) e a microscopia de epifluorescência utilizada para determinar a integridade acrossomal, integridade da membrana plasmática e potencial de membrana mitocondrial. Microscopia de contraste de fase foi utilizada para avaliar a motilidade total e o vigor espermático no teste de termo resistência (TTR), nos tempos de 0, 60, 120 e 180 minutos. A criopreservação de espermatozóides com Antipaina diminuiu os parâmetros cinéticos pós-descongelamento de MP, VSL, LIN, SRT e a porcentagem de espermatozóides hiperativados, PAI-1 (210 ƞg) diminuiu VSL e LIN. Antipaina e PAI-1 não tiveram efeitos nos parâmetros de integridade da membrana plasmática, potencial de membrana mitocondrial e defeitos espermáticos. Espermatozóides criopreservados na presença de Antipaina e PAI-1 (70 e 140 ƞg) aumentaram significativamente a integridade acrossomal, assim como foram capazes de completarem a reação acrossômica in vitro. As principais constatações a partir da suplementação de diferentes antioxidantes no diluidor de criopreservação espermática foram: (i) melhora na motilidade total pós-descongelamento dos espermatozóides incubados a 37°C durante 60 minutos, quando criopreservados com adição de óleo essencial de limão nas concentrações de 100 e 150 uM, (ii) nenhuma melhora na integridade da membrana plasmática, integridade acrossomal e potencial de membrana mitocondrial quando criopreservados com adição de óleo essencial de limão,  limoneno R-(+) e limoneno S-(-), (iii) todas as concentrações do óleo essencial de limão mostrou-se eficaz na redução das ROS intracelular de espermatozóides bovinos. Em conclusão, os inibidores de serino protease, Antipaina e PAI-1 (70 e 140ƞg) são capazes de preservar a integridade acrossomal de espermatozóides criopreservados de bovinos, assim como a adição do óleo essencial de limão na criopreservação de espermatozóides de bovinos Curraleiro Pé-Duro, melhorou a motilidade espermática total e preservou a célula espermática contra os danos do estresse oxidativo.

MEMBROS DA BANCA:
Interno - 423174 - AMILTON PAULO RAPOSO COSTA
Externo à Instituição - ANTONIO DE SOUSA JUNIOR - UFPI
Presidente - 422578 - MARIA ACELINA MARTINS DE CARVALHO