Isolamento e caracterização de linhagens de células-tronco mesenquimais obtidas a partir da polpa dentária imatura de cães
dente, decíduo, cão, célula-tronco, cultivo celular
Estudos com células-tronco de tecidos adultos e pós-natais vêm sendo realizados como alternativa, para as terapias com células-tronco embrionárias. A polpa de dente representa uma fonte para obtenção de células-tronco mesenquimais (CTM), que vêm demonstrando um tipo promissor, pelo seu grande potencial de diferenciação e características inócuas. Dessa forma, esta pesquisa teve por objetivo isolar, expandir, diferenciar e caracterizar as células-tronco mesenquimais da polpa de dente imatura de cães (CTMPD-ic). Para tanto, foram utilizados três dentes decíduos, dos quais foram obtidas as polpas dentárias. Este tecido foi dissociado mecanicamente e cultivado em meio DMEM-F12 suplementado com 1% de ATB, com troca a cada três dias. A partir do crescimento das células originadas dos explantes cultivados das polpas dentárias foram realizadas, curva de crescimento celular, UFC, diferenciação celular e citometria de fluxo. Foi observado na curva de crescimento, em duplicata, durante dez dias, progressiva e intensa proliferação celular, com a presença das fases LAG, LOG e PLATEAU. Quanto à unidade formadora de colônias (UFC) em cultura primária com 20 dias, obteve-se um total de 27 colônias. As células mesenquimais da polpa dentária induzidas in vitro à diferenciação osteogênica, adipogênica e condrogênica, evidenciaram osteoblastos, gordura e condrócitos, respectivamente. Na citometria de fluxo, as CTMPD-ic apresentaram expressão dos marcadores CD90 e CD105 e ausência de marcação em CD14 e CD45. Desta forma, pôde-se constatar que as células oriundas da polpa de dente imatura canina apresentam potencial de diferenciação celular e características imunofenotípicas inerentes às células-tronco mesenquimais, sem o entrave de obtenção por procedimentos cirúrgicos, e com grande crescimento celular exponencial em curto período de tempo. As CTMPD-ic representam uma fonte nova para utilização em cães, onde a medicina regenerativa avança a passos largos, apresentando como diferencial em relação às CTM de outras fontes, o seu crescimento celular e seu potencial de diferenciação. Ademais, possibilita a formação de um banco de CTM-ic para futuras terapias celulares e alo-enxertos em cães.