IMOBILIZAÇÃO DA PAPAÍNA POR LIGAÇÃO COVALENTE EM SUPORTE HÍBRIDO CONTENDO NANOPARTÍCULAS DE ÓXIDO DE ZINCO E QUITOSANA: SINTESE, CARACTERIZAÇÃO E AVALIAÇÃO DA ATIVIDADE CITOTOXICA
ZnO NPs, Quitosana, Papaína, Imobilização
Papaína (carica papaya) foi covalentemente imobilizada no suporte híbrido contendo nanopartículas de óxido de zinco (ZnO NPs) e quitosana - ZnO/quitosana. Estrutura e capacidade de transferência de carga foram investigadas por difração de raios-X (DRX), espectroscopia eletrônica e vibracional na região do UV-Vis, infravermelho com transformada Fourier e voltametria cíclica, respectivamente. Os planos cristalográficos para ZnO, ZnO/quitosana e papaína imobilizada foram observados por DRX. Os espectros eletrônicos apresentaram máximos de absorção no UV-Vis em 371 nm para ZnO NPs, 377 nm ZnO/quitosana e 192 e 352 nm para papaína imobilizada referentes as transições d-d, e n→π* relativas às ZnO NPs e papaína, respectivamente. O espectro de FTIR para as ZnO NPs apresentou o estiramento intenso em 497 cm-1 referente a Zn-O confirmando a formação das ZnO NPs, enquanto que o suporte ZnO/quitosana apresentou as bandas características das ZnO NPs e da quitosana, já no espectro de FTIR para a enzima imobilizada pode se observar, além das bandas características das ZnO NPs e da quitosana, um aumento na absorbância da banda em 1655 cm -1 podendo ser indicativo da formação da ligação N=C. O filme cast de ZnO NPs exibiu capacidade de transferência de carga superior à do substrato limpo (FTO), enquanto que os filmes do suporte e da enzima imobilizada apresentaram capacidade de transporte de carga inferior à do substrato em decorrência da presença de quitosana na estrutura. Todas as análises confirmam a formação das ZnO NPs, do suporte bem como a imobilização da papaína. Os ensaios farmacológicos mostraram que a enzima imobilizada possui baixa citotoxicidade em macrófagos (CC50 = 488,354 μg·mL-1), sendo citotóxica apenas nas concentrações mais elevadas, e em eritrócitos. Além disso a enzima imobilizada provoca um aumento na capacidade fagocítica dos macrófagos em baixas concentrações e diminui este parâmetro em concentrações elevadas. A síntese de NO dos macrófagos mostrou-se inversamente proporcional a concentração de papaína imobilizada no meio, graças ao aumento da citotoxicidade.